分光光度法
分光光度法是基于不同分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)對(duì)電磁輻射的選擇性吸收而建立的一種定性、定量分析方法，是居室、紡織品、食品中甲醛檢測(cè)最常規(guī)的一種方法。涉及到的有乙酰丙酮法、酚試劑法、AHMT法、品紅一亞硫酸、變色酸法、間苯三酚法、催化光度法等，每種檢測(cè)方法所偏重的應(yīng)用領(lǐng)域不同，并各有其優(yōu)點(diǎn)和一定的局限性。
⒈乙酰丙酮法
乙酰丙酮法指在過(guò)量銨鹽存在下，甲醛與乙酰丙酮通過(guò)45～60℃水浴30min或25℃室溫下經(jīng)2.5h反應(yīng)生成黃色化合物，然后比色定量甲醛含量。甲醛與乙酰丙酮反應(yīng)的特異性較好，干擾因素少，酚類和其它醛類共存時(shí)均不干擾，顯色劑較為穩(wěn)定，檢出限達(dá)到0.25 me/L[Bl，測(cè)定線性范圍較寬，適合高含量甲醛的檢測(cè)，多用于居室和水發(fā)食品中對(duì)甲醛的測(cè)定。但在進(jìn)行水發(fā)食品中甲醛檢測(cè)時(shí)，需將樣品中的甲醛在磷酸介質(zhì)中加熱蒸餾提取出來(lái)，經(jīng)水溶液吸收、定容后再檢測(cè)，操作過(guò)程復(fù)雜、繁瑣、耗時(shí)。
⒉試劑法
酚試劑法即MBTH法，即甲醛與酚試劑（3-甲基-2-苯并噻唑腙鹽酸鹽，μgrn）反應(yīng)生成嗪，嗪在酸性溶液中被鐵離子氧化成藍(lán)色，室溫下經(jīng)15rain后顯色，然后比色定量[m]。酚試劑法操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，檢出限為0.02mg/L，較適合測(cè)定微量甲醛測(cè)定。但脂肪族醛類也有類似的反應(yīng)，對(duì)測(cè)定會(huì)有干擾，二氧化硫?qū)y(cè)定也有一定的干擾，使結(jié)果偏低，所以，在測(cè)定吊白塊時(shí)應(yīng)用此方法要慎重。酚試劑的穩(wěn)定性較差，顯色劑MITI?H在4℃冰箱內(nèi)僅可以保存3d，顯色后吸光度的穩(wěn)定性也不如乙酰丙酮法，顯色受時(shí)間與溫度等的限制。本法多用于居室中對(duì)甲醛的檢測(cè)。紡織品和食品中對(duì)甲醛的測(cè)定有時(shí)也用該方法一。
⒊AHMT法
AHMT法指甲醛與AHMT（4-氨基-3-聯(lián)氨-5-巰基-1，2，4-三氮雜茂）在堿性條件下縮合，經(jīng)高碘酸鉀氧化成紫紅色化合物，然后比色定量檢測(cè)甲醛含量的方法。AHMT法在室溫下就能顯色，且SO、NO共存時(shí)不于擾測(cè)定，靈敏度比比色法要好。該方法特異性和選擇性均較好，在大量乙醛、丙醛、丁醛、苯乙醛等醛類物質(zhì)共存時(shí)不干擾測(cè)定，檢出限為0.04 mg/L。但AHMT法在操作過(guò)程中顯色隨時(shí)間逐漸加深，標(biāo)準(zhǔn)溶液的顯色反應(yīng)和樣品溶液的顯色反應(yīng)時(shí)間必須嚴(yán)格統(tǒng)一，重現(xiàn)性較差，不易操作，多用于居室中對(duì)甲醛的檢測(cè)。其檢測(cè)技術(shù)要求如下所示：
檢測(cè)原理：堿性溶液中與AHMT發(fā)生反應(yīng)，經(jīng)高碘酸鉀氧化成紅色化合物，半定量地快速檢測(cè)液體樣品中人為加入的甲醛含量。該方法優(yōu)點(diǎn)是抗干擾能力強(qiáng)，缺點(diǎn)是顏色隨時(shí)間逐漸加深，要求標(biāo)準(zhǔn)比色卡顯色標(biāo)注時(shí)間和樣品溶液的顯色反應(yīng)時(shí)間必須嚴(yán)格統(tǒng)一。
主要儀器：10mL納氏比色管，或者具塞塑料離心管。
試劑：
①試劑A：飽和氫氧化鉀或5mol/L氫氧化鉀溶液。取289氫氧化鉀溶于適量蒸餾水中，稍冷后，加蒸餾水至100mL。
②試劑B：5g/L AHMT鹽酸溶液。取0.5g AHMT溶于100mL 0.2mol/L鹽酸溶液中，此溶液置于暗處或保存于棕色瓶中，可保存半年。
③試劑C：1.5%高碘酸鉀的氫氧化鉀溶液。稱取1.5g KIO4于100mL 0.2mol/L氫氧化鉀溶液中，置于水浴上加熱使其溶解，備用。
操作步驟：吸取樣品提取液上清液0.5mL于檢測(cè)管中，加入2滴試劑A溶液，2滴試劑B溶液，蓋上蓋子搖勻。1～2min后打開(kāi)盞，向檢測(cè)管中加入試劑c溶液1滴，并蓋上蓋子搖勻，觀察情況。
結(jié)果判定：室溫下靜置3min，肉眼觀察顯色結(jié)果，并與“3min時(shí)間點(diǎn)色階”比較得出待測(cè)樣品中甲醛含量。待測(cè)樣品中甲醛含量在10mg/kg以下時(shí)建議采用15min時(shí)間點(diǎn)的反應(yīng)結(jié)果，并與“15min時(shí)間點(diǎn)色階”比較得出待測(cè)樣品中甲醛含量。
⒋品紅一亞硫酸法
品紅一亞硫酸法指利用甲醛與品紅一亞硫酸在濃硫酸存在條件下呈藍(lán)紫色的特性，用比色定量進(jìn)行檢測(cè)的方法[HI1。本法利用的是甲醛的特有反應(yīng)，其它醛與酚不干擾測(cè)定。此法操作簡(jiǎn)便、測(cè)定范圍寬，但其比色液很不穩(wěn)定，重現(xiàn)性較差，在測(cè)定甲醛含量較低的樣品時(shí)，差異較大，精確度不如乙酰丙酮法，而且品紅一亞硫酸法受溫度影響較大，檢測(cè)過(guò)程還需濃硫酸，故一般多用于食品中甲醛的定性分析。
⒌變色酸法
變色酸法指將甲醛在濃硫酸介質(zhì)中與鉻變酸（1，8-二羥基萘-3，6-二磺酸）作用，在沸水浴中生成紫紅色化合物，進(jìn)行比色定量的方法。此法靈敏度高，檢出限為0.1 mg/L比色液穩(wěn)定。但當(dāng)酚類和其添加劑離子共存時(shí)有干擾，因此該法不適用于測(cè)定甲醛含量較高的樣品。因含甲醛量高的溶液遇酸極易產(chǎn)生聚合物，所以該反應(yīng)須在濃硫酸介質(zhì)作用下進(jìn)行，操作較繁瑣，因此該法多用于方法研究，實(shí)際檢測(cè)時(shí)應(yīng)用較少。
⒍間苯三酚法
間苯三酚法指利用甲醛在堿性條件下與間苯三酚發(fā)生縮合反應(yīng)生成橘紅色化合物的特性，進(jìn)行比色定量檢測(cè)甲醛含量的方法。此法操作簡(jiǎn)便、干擾物影響小，檢出限為0.1 mg/L。但甲醛與間苯三酚生成物的顏色不穩(wěn)定，測(cè)定結(jié)果偏差較大，只適用于甲醛的定性分析．此法多用于水發(fā)食品中對(duì)甲醛的測(cè)定。
⒎亞硝基亞鐵氰化鈉法
檢測(cè)原理：在堿性條件下，甲醛與亞硝基亞鐵氰化鈉反應(yīng)后使溶液出現(xiàn)藍(lán)色特征。本方法為農(nóng)業(yè)部部頒標(biāo)準(zhǔn)方法。
主要儀器：10mL納氏比色管，或者具塞塑料離心管。
試劑：
①4%鹽酸苯肼溶液稱取固體鹽酸苯肼49溶于水中，稀釋至100mL（現(xiàn)用現(xiàn)配）。
②5%亞硝基亞鐵氰化鈉溶液稱取固體亞硝基亞鐵氰化鈉59溶于水中，稀釋至100mL（現(xiàn)用現(xiàn)配）。
③10%氫氧化鉀溶液稱取固體氫氧化鉀109溶于水中，稀釋至100mL。
操作步驟：取樣品制備液（為上文“樣品處理”中的“上清液”或“浸泡液”）5mL于10mL納氏比色管中，然后加入1mL 4%鹽酸苯肼、3～5滴新配的5%亞硝基亞鐵氰化鈉溶液，再加入3～5滴10%氫氧化鉀溶液，5min內(nèi)觀察顏色變化。
結(jié)果判定：溶液若呈藍(lán)色或灰藍(lán)色，說(shuō)明有甲醛，且甲醛含量較高；溶液若呈淺藍(lán)色，說(shuō)明有甲醛，且甲醛含量較低；溶液若呈淡黃色，甲醛未檢出。
注意事項(xiàng)：該方法顯色時(shí)間短，應(yīng)在5min內(nèi)觀察顏色的變化。
⒏氯化鐵法
5%氯化鐵溶液：稱取固體氯化鐵59g溶于水中，稀釋至100mL（現(xiàn)用現(xiàn)配）。
鹽酸溶液：量取鹽酸10mL，加到90mL的水中。
取樣品制備液5mL于10mL納氏比色管中，加入新配的4%鹽酸苯肼溶液1mL及3～5滴，加入鹽酸使呈酸性，溶液如果呈紅色，表示有甲醛。
電化學(xué)法
電化學(xué)分析法是基于化學(xué)反應(yīng)中產(chǎn)生的電流（伏安法）、電量（庫(kù)侖法）、電位（電位法）的變化，判斷反應(yīng)體系中分析物的濃度進(jìn)行定量分析的方法，用于甲醛檢測(cè)的有極譜法和電位法2種．
⒈示波極譜測(cè)定法
示波極譜測(cè)定法簡(jiǎn)稱極譜法，是通過(guò)獲得的電流一電壓曲線即極譜波來(lái)進(jìn)行分析測(cè)定的方法。甲醛在鹽酸苯肼一氯化鈉底液中產(chǎn)生一個(gè)明晰的極譜波，峰電流與甲醛含量成正比，根據(jù)樣品峰電流與甲醛標(biāo)準(zhǔn)峰電流比較進(jìn)行定量檢測(cè)；或在pH值為5的乙酸一乙酸鈉介質(zhì)中，甲醛與硫酸肼的反應(yīng)產(chǎn)物產(chǎn)生一個(gè)靈敏的吸附還原波，其峰高與甲醛濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，根據(jù)這種關(guān)系對(duì)甲醛進(jìn)行定量檢測(cè)。該法操作簡(jiǎn)便、選擇性好，但是極譜分析法對(duì)試樣的前處理要求比較高，使用的“滴汞電極”有污染，多用于食品和食品包裝材料中對(duì)甲醛的檢測(cè)。
⒉電位法
電位法也稱離子選擇電極法，是利用膜電極將被測(cè)離子的活度轉(zhuǎn)換為電極電位而加以測(cè)定的一種方法。在硫酸介質(zhì)中，甲醛對(duì)溴酸鉀氧化碘化鉀具有促進(jìn)作用，利用這個(gè)特性，用碘離子選擇電極跟蹤，可建立測(cè)定微量甲醛的動(dòng)力學(xué)電位法。（該方法的線性范圍為0～5 mg/L，檢出限為0.055 mg/L。）此法是一新研究方法，在實(shí)際應(yīng)用中較少。
色譜法
色譜具有強(qiáng)大的分離效能，不易受樣品基質(zhì)和試劑顏色的干擾，對(duì)復(fù)雜樣品的檢測(cè)靈敏、準(zhǔn)確，可直接用于居室、紡織品、食品中對(duì)甲醛的分析檢測(cè)。也可將樣品中的甲醛進(jìn)行衍生化處理后，再進(jìn)行測(cè)定的。常用的衍生劑有2，4-二硝基苯肼（DNPH）、瞇唑、乙硫醇、硫酸肼等。隋雪燕等將樣品中的甲醛與DNPH衍生化，生成2，4-二硝基苯腙，經(jīng)甲苯或正己烷萃取，用毛細(xì)管或填充柱氣相進(jìn)行色譜分離，再用電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)保留時(shí)間和峰高進(jìn)行定性和定量檢測(cè)，檢出限為0.0015 mg/L，其中乙醇、丙酮、二氧化硫、氮氧化物等均不會(huì)產(chǎn)生干擾。陳笑梅等[馴將樣品中甲醛與DNPH衍生化后，經(jīng)萃取，用高效液相色譜進(jìn)行分離，用紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)保留時(shí)間和峰面積進(jìn)行定性和定量檢測(cè)，檢出限可達(dá)0.05 mg/Lt馴。居室、紡織品、食品中樣品組分一般較復(fù)雜，干擾組分多，甲醛含量又低，常規(guī)檢測(cè)方法中需耗費(fèi)大量的時(shí)間精力進(jìn)行分離、濃縮等預(yù)處理后再進(jìn)行檢測(cè)。色譜法靈敏度高、定量準(zhǔn)確、抗干擾性強(qiáng)，可直接用于居室、紡織品、食品中甲醛的檢測(cè)．色譜法測(cè)定范圍：若以0.2L/min流量采樣20L時(shí)，測(cè)定范圍為0.02～1mg/m3。檢出下限：0.01mg/m3。但是色譜法對(duì)設(shè)備要求較高，衍生化時(shí)間長(zhǎng)，萃取等步驟、操作過(guò)程煩瑣，不適合于一般實(shí)驗(yàn)室和家庭的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，難以滿足市場(chǎng)需求。
傳感器
用于檢測(cè)甲醛的傳感器有電化學(xué)傳感器、光學(xué)傳感器和光生化傳感器等。電化學(xué)傳感器結(jié)構(gòu)比較簡(jiǎn)單，成本比較低，其中高質(zhì)量的產(chǎn)品性能穩(wěn)定，測(cè)量范圍和分辨率基本能達(dá)到室內(nèi)環(huán)境檢測(cè)的要求。但缺點(diǎn)是所受干擾物質(zhì)多，且由于電解質(zhì)與被測(cè)甲醛氣體發(fā)生不可逆化學(xué)反應(yīng)而被消耗，故其工作壽命一般比較短。光學(xué)傳感器價(jià)格比較貴，且體積較大，不適用于在線實(shí)時(shí)分析，使其使用的廣泛性受到限制。雖然光生化傳感器提高了選擇性，但是由于酶的活性以及其它因素導(dǎo)致傳感器不穩(wěn)定，缺乏實(shí)用性，而且一般甲醛氣體傳感器的價(jià)格過(guò)高，難以普及。
測(cè)定
1.原理
空氣中甲醛在酸性條件下吸附在涂有2,4-二硝基苯（2,4-DNPH)6201擔(dān)體上，生成穩(wěn)定的甲醛腙。用二硫化碳洗脫后，經(jīng)OV-色譜柱分離，用氫焰離子化檢測(cè)器測(cè)定，以保留時(shí)間定性，峰高定量。
測(cè)定范圍：若以0.2L/min流量采樣20L時(shí)，測(cè)定范圍為0.02～1.00mg/m3。
檢出下限：0.01mg/m3
2.儀器和設(shè)備
⑴采樣管：內(nèi)徑5mm，長(zhǎng)100mm玻璃管，內(nèi)裝150mg吸附劑，兩端用玻璃棉堵塞，用膠帽密封，備用。
⑵空氣采樣器：流量范圍為0.2～10L/min。
⑶具塞比色管：5mL。
⑷微量注射器：10μL。
⑸氣相色譜儀：帶氫火焰離子化檢測(cè)器。
⑹色譜柱：長(zhǎng)2m，內(nèi)徑3m m的玻璃柱，內(nèi)裝固定相（OV-1），色譜擔(dān)體Shimatew（80～100目）。
3.試劑
⑴二硫化碳：需重新蒸餾進(jìn)行純化。
⑵2，4-DNPH溶液：稱取0.5mg 2，4-DNPH于250mL容量瓶中，用二氯甲烷稀釋至刻度。
⑶2mol/L鹽酸溶液。
⑷吸附劑：10g 6201擔(dān)體（60～80目），用40mL 2，4-DNPH二氯甲烷飽和溶液分兩次涂敷，減壓、干燥，備用。
⑸甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：配制和標(biāo)定方法同AHMT比色法。
注意事項(xiàng)
①任何一種方法都可作為甲醛定性測(cè)量方法，必要時(shí)幾種方法同時(shí)使用。
②使用的試劑注意是否必須現(xiàn)用現(xiàn)配。
③可根據(jù)顯色的程度與標(biāo)準(zhǔn)色卡比較，半定量判定食品中含甲醛的參考含量，注意顯色時(shí)間。
④國(guó)家農(nóng)業(yè)部NY 0250 73-2006《無(wú)公害食品水產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)限量》規(guī)定甲醛不出，其他食品中不得檢出甲醛。
⑤對(duì)于測(cè)定結(jié)果為陽(yáng)性的樣品應(yīng)慎重處置，建議送樣品至實(shí)驗(yàn)室或法定檢測(cè)機(jī)構(gòu)做精量。
